骨关节结核的临床诊断主要依据临床表现和辅助检查的X线片及CT片,但病原学诊断还需依赖细菌学检验。但因为长期应用抗结核药物及取材、培养等因素,使细菌培养的阳性率很低,一般不超过20%,而且培养的时间也较长,需要3~8周随着生物技术的发展,聚合酶链反应(PCR)的诞生,国外很多学者已将PCR技术应用于骨关节结核的病理诊断中,并收到了优良效果,现已有标准的模板结核DNA及相应的引物合成试剂,应用简单。其实验方法为取一2mm3大小的结核组织块加入 Mris、NaOH、SDS等制成乳剂,经煮沸、离心及苯芬***/异戊醇混合液提取,NaAC和无水乙醇沉淀后,进行PCR扩增,再于1.2g%琼脂糖凝胶电泳,然后于紫外灯下观察色带。PCR扩增法检测的是结核菌中细胞核内的D)NA,其阳性敏感率较细菌培养法大大提高,而且微量细菌或已被杀死细胞的LNA存在,就可以检测出来,也就是说只要检测物中含有结核菌的DNA,即可扩增出!DNA的特异片段。因此,检测物中即使无活细菌或检测物是经过固定液固定后,均不影响检测结果。而且PCR扩增技术仅需2天就可以报告结果,大大缩短了检测时间,为临床诊断提供了重要依据。
由上述可见,PCR技术的应用具有敏感、快速、高效、特异等优点,是一种在基因水平上诊断结核的技术,对各种骨关节结核的诊断和鉴别诊断具有特殊意义。