拔除中心静脉插管时应严格遵照无菌操作的要求,包括消毒皮肤以及此后的各个步骤,以确保微生物检验结果的可靠性。中心静脉插管的许多部分均被用于诊断感染;然而,最常使用的是导管尖端及接头部分(表26)。由于直至大量微生物定居于中心静脉插管最远端后大多数CRS病例才有临床表现,最好使用导管尖端(远端的30至50mm)进行培养。
定性培养可以提示导管上有何种菌落定居,但是不能区分单纯的定居和真正的导管感染。因此,这些方法不能用于确定导管是否为造成全身性感染的明确原因。正因如此,定量培养才被用于上述鉴别诊断。Maki等建立了一种半定量培养方法,将导管远端在标准的 Petri盘(90mm)中的凝胶表面滚动,之后进行培养。若培养结果大于或等于15cfu,则认为高度提示导管感染,若菌落计数较少,则提示单纯的定居。这种简单的技术可在所有的微生物学实验室进行,目前已经成为比较所有新的CRS诊断方法的参照。Maki的研究首先描述了评价导管相关性感染
的有效方法,尽管所采用的分界值(15cfu)仅是人为确定的导管形状、大小以及制造材料,患者的情况,以及拔除导管时患者可能因其它原因接受抗生素治疗等,都是能够影响上述诊断标准的因素。自从1977年提出后,由于以上因素的影响,这种技术并未成为得到广泛采用。Clei发明了一种定量培养技术,将肉汤培养基冲洗导管腔后进行培养,从而使导管腔外培养与腔内培养相结合。进行操作时,将待检导管一段置于2ml肉汤培养基中,用注射器反复冲洗3次。然后将0.lml肉汤培养基按1:10和1:100稀释,种植于血凝胶中。作者将>1000cfu/ml确定为导管感染。采用这种阳性标准诊断CRS,其敏感性为100%,特异性为95%。尽管这项技术较为复杂,但其优点在于除腔外感染之外,还能够发现通过腔内途径发生的感染。理论上,Maki法仅能确定经由表皮来源,沿导管外部发生的感染,因为滚动技术只能研究导管的外表面。
Brun- Buisson等人描述了一种较为简单的定量培养方法，他们将一段待检导管置于装有lml无菌蒸馏水的管中。振荡1钟后,取出0.1ml悬液置于血凝胶中。采用1000cfu/ml作为临界值,这种方法对于导管相关性感染(CRI)诊断的敏感性为97.5%,特异性为88%,而对于导管相关性菌血症(CRB)的诊断敏感性和特异性均为100%。
同时还发现,将导管浸入10ml肉汤中,超声振荡1分钟,然后取出0.1ml,按照1:100稀释后并不能显著提高上述方法的至此已经介绍的定量培养方法尚无法区分导管相关性感染是腔内抑或腔外途径造成,这是因为培养方法本身不能区分两个表。1985年, Linares等人对Clei的定量培养方法进行了改善，从而使得上述鉴别成为可能。作者用2ml培养基冲洗导管的内表面,然后取出0.1ml逐步稀释,进行定量培养以确定腔内定居情况。然后,按照Maki法进行导管培养,以确定导管腔外细菌定居情况。这种方法非常耗费人力,但敏感性为100%,在CRI的病理生理学研究中尤其得到重视。采用这种方法,同一作者证实在CRI的发病过程中导管接头受到污染的重要性。

上述诊断方法需要等待18~24小时才能得到结果。可以对拔除的导管进行革氏染色或丫啶橙染色,这种快速方法能够对感染的导管作出早期诊断。在显微镜下每观察20个视野发现1个微生物,即可判定为阳性。然而,快速诊断方法需要精细的判读,敏感性和特异性都很低。而且仅可用于薄壁的透明塑料导管。