1963年，Randel等提出了“葡萄糖-脂肪酸循环”学说，认为葡萄糖和脂肪酸的氧化代谢存在相互竞争，提示脂肪酸在代谢中存在重要作用。近来的研究发现，血浆游离脂肪酸（free fatty acid，FFA）浓度的升高与糖尿病、动脉硬化以及多种代谢疾病均有密切的关系，因此在各种代谢疾病中进行FFA的研究已经成为内分泌代谢领域的一个热点。

    最开始FFA采用萃取滴定法或气相色谱法和高效液相层层析法测定，相当复杂，花费也比较高，主要在基础研究中使用，难以进入临床实用。现在FFA可以采用通过自动分析仪进行快速大量的测定，在国内部分医院中FFA已经成为临床的常规检测，可以直接作为血脂检查的一个项目进行化验，检测方便，花费也很小，能够为临床提供更多的帮助。但是判断FFA的结果和判断其他血脂检查的结果一样吗？患者一次FFA结果异常我们如何和患者解释呢？很多人可能对FFA具体的测定方法、结果的稳定性和可能的干扰因素还不太了解，我们有必要对FFA的测定进行比较深入的了解。

    FFA实际上更加准确的称呼是非酯化脂肪酸或未酯化脂肪酸（non-esterified fatty acid，NEFA），它与酯化的脂肪酸如甘油三酯等相对应。FFA约占血总脂肪酸的10%。血中脂肪酸主要为长链脂肪酸，一般不溶于水，在血中FFA与白蛋白结合进行运输，是一种简单的脂蛋白。所以FFA中游离的意义和游离睾酮或游离皮质醇的意义是不一样的，FFA中的游离主要是指非酯化，它实际上是和白蛋白结合的，而游离睾酮或游离皮质醇中的游离是指未和结合蛋白结合的激素，我们应该注意这个区别。

    目前临床上的FFA测定主要通过酶学比色法进行测定，又称为ACS-ACOD法。其原理是FFA首先在乙酰辅酶A合成酶（Acyl-CoA synthetase，ACS）的催化下变为脂酰辅酶A，然后脂酰辅酶A在脂酰辅酶A氧化酶（Acyl-CoA oxidase，ACOD）的催化下产生过氧化氢，过氧化氢与显色剂进行反应后产生蓝紫色的物质，可以吸收550 nm波长的光，从而可以通过比色法进行FFA浓度的测定。从中可以看出，ACS-ACOD法并不是直接测定FFA的浓度，而是通过它产生的过氧化氢进行间接的比色测定，因此测定时存在受到氧化-还原物质和含颜色物质的影响的可能。通过ACS-ACOD法测定FFA，各单位需要在本单位的试验条件下确定各自的正常值，因此可能不同医院正常值会有所不同。

    在判断FFA的临床意义之前我们首先要了解FFA的代谢途径。FFA是机体的主要能量物质，人体的50%～90%热能需要由血浆中循环的FFA供给。正常人体以这种方式每小时周转的脂肪酸量高达25 g。FFA的半衰期仅有1～2 min。因此FFA的变化是比较快的。FFA的来源是从消化道吸收入血，脂蛋白脂酶水解脂蛋白复合物中的甘油三酯或胆固醇酯，脂肪细胞内的脂酶水解储存的甘油三酯。其中最主要的是脂肪细胞内的脂酶水解储存的甘油三酯，有多个激素可以影响这一过程。影响该过程的激素首先也是胰岛素，胰岛素是一个促进脂肪合成的激素，在进餐后抑制脂肪分解，所以餐后FFA减少，而饥饿时FFA增加。β肾上腺素系统是非常重要的促进脂肪分解的机制，运动和应激可以通过肾上腺素分泌增加FFA的含量。

    从以上影响因素可以看出饥饿和运动可以造成生理性的FFA增加。所以应该注意抽血的时间，FFA的测定患者需要空腹，但空腹时间过长脂肪分解增加也可以增加FFA的浓度，抽血前要尽量避免剧烈运动和应激，随机采取血浆测定FFA在临床上是没有意义的。FFA在抽血后需要马上进行测定，这是因为血中的脂肪酶如脂蛋白脂酶和磷脂酶等可以水解脂肪产生FFA，因此如果放置一段时间后再进行测定可能会假性增加FFA的浓度。所以要想非常准确地测定FFA，最好预冷抽血的试管，整个检测均在冰上进行。如果不能及时测定可以冰冻保存，而4 ℃时血标本可以保存2 d。另外血中甘油三酯水平很高（＞1000 mg/dl）时，离体标本中脂肪酶分解产生的FFA会更多，使结果出现假性增高[3]。由于肝素可以增加脂蛋白酯酶的活性，增加血中的FFA浓度，因此在使用肝素抗凝的患者中FFA的测定是不可靠的，从由肝素抗凝的套管针中抽血也有可能对FFA的测定产生很大影响，另外抽血时不能使用肝素抗凝的抽血管，而乙二胺四乙酸（EDTA）、枸橼酸等抗凝不会影响FFA的测定。虽然ACS-ACOD法需要用到氧化反应及比色法，但是一般来说，维生素C和溶血不会影响结果，胆红素可能会轻度减少测定值。

    从上一段我们可以看到，FFA由于受到的干扰因素较多，包括空腹时间的长短、抽血前运动的情况，甚至前一天的饮食和运动都有可能对结果产生较大影响，所以不同日期测定结果也会有较大的波动。在一个研究中[4]，对12位健康个体进行了连续12 d的空腹常见代谢变量（包括血糖、甘油三酯和FFA等）的测定，结果发现，同一个体的FFA在不同日期测定有着相当大的波动，个体内变异达到45%，而个体间变异（不同个体之间的差别）则只有32%，也就是说不同日期的个体内变异超过了个体间变异。而在同一个实验中空腹血糖测定的个体内变异是4.8%，个体间变异是7.5%，所以一次的空腹血糖测定能够相对比较准确地反应患者平时的血糖水平。而空腹甘油三酯水平的个体内变异为21%，个体间变异为20%，甘油三酯的个体内测定变异水平是比较高的，我们在临床工作中也会有体会，今天测定的甘油三酯水平可能会与过几天测定的甘油三酯水平有比较大的差别。在许多研究中甘油三酯水平不能独立地预测心血管疾病的风险，甘油三酯测定波动大也是其中的重要原因之一。与之对比，高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）与甘油三酯水平呈非常好的负相关，但不同日期测定的波动非常小，因而在多变量分析中发现HDL-C与心血管疾病的相关性要比甘油三酯水平与心血管疾病的相关性更好。而FFA的个体内变异水平还要高于甘油三酯，这就对单独一次测定FFA能否作为一个准确的指标打上了问号。我们知道，对于水平波动比较大的代谢指标，我们可以采取多次测定取平均值的方法来更准确地判断，对于FFA，需要测定15次取平均值才能有80%的把握使结果的准确度控制在±15%之内。而对于空腹血糖，测定一次就可以达到相同的把握度，空腹甘油三酯则需要测定3次取平均值。因此，从统计学角度，FFA的一次测定结果可能不能准确地反应个体的实际情况。

    在对FFA浓度结果进行判定时还有一个需要注意的问题，即FFA可以有不同的长度和不同的饱和度，我们测定的FFA实际上是这些不同长度和饱和度的脂肪酸的混合物。正常血清中十八碳的油酸占54%，十六碳的软脂酸占34%，十八碳的硬脂酸占6%，另外还有少量十二碳的月桂酸、十四碳的肉豆蔻酸和二十碳的花生四烯酸。不同的脂肪酸，如饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸起的作用是不一样的，饱和脂肪酸对代谢产生不良影响，而不饱和脂肪酸则对饱和脂肪酸的不良影响有保护作用。饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸之间的比例受到食物中这两种成分比例的影响。所以，单从FFA的总浓度有时不能精确地判断脂肪酸的作用是有益的还是有害的，如果能结合其中饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸的比例进行分析，可能更有利于预后的判断。具体测定不同脂肪酸的含量一般需要使用高效液相色谱法，目前还不能进入常规的临床使用。

    综上所述，FFA在技术上已经可以方便快捷地在临床工作中进行测定，但由于FFA水平受到的干扰因素较多，在分析结果时首先要注意标本采集的条件，是否为空腹，抽血前避免剧烈运动和应激，抽血后标本是否及时送检；其次由于FFA的个体内变异水平较大，单次抽血结果的分析需要谨慎。随着FFA测定在临床工作中更多的应用，我们需要更多的总结这项指标的临床意义，以便更好地为临床工作服务。（游离脂肪酸做好作为常规临床检测的准备了吗 张化冰，肖新华）