【PPT】【专家讲座】血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸检测技术 - 医学资源下载
资源作者：hehelili
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上传日期：2013-07-30 14:09:38

血液乙肝、丙肝和艾滋病病毒核酸检测技术及应用 浙江省血液中心 朱发明 2010-04 提纲 输血风险 血液NAT筛查 必要性 NAT筛查现状 现有技术 实时荧光PCR 转录介导扩增技术 国内数据情况 实施过程中的要点 结果分析解释要点 进展与动态 输血风险 输血不良反应的比例 残留风险的来源 感染窗口期 90%以上 现有试剂未检测病毒变异 (种属,亚型) 感染后免疫沉默携带者（抗体阴性） 持续病毒感染但血清学阴性 比较罕见 HCV事例 2 例标本HCV RNA阳性，6个月后HCV抗体阴性(120万检测标本) 错误 (人为错误） 0.05% 确认阳性人为偏差为阴性 (Busch et al. Trans. 2000) 核酸检测的必要性和可行性 存在残留风险 数据未知 窗口期事件 90%以上 ELISA检测技术不足 **要求 社会期望 行业需求 核酸技术日趋成熟 经济的发展 关注输血传播性疾病 HBV 早期感染标志物 HCV 早期感染标志物 HIV-1流行 HIV 早期感染标志物 NAT检测的现状 国际上 1990s’欧洲开始对血液制品进行核酸检测（HIV,HCV） 1996年美国开始评估NAT技术在血站的应用 中国香港，新加坡，马来西亚，印尼等周边国家采用NAT技术 检测（单检、混样） 国内情况 血站早期研究数据 部分血站进行NAT检测 血站大规模试点 血制品要求进行筛选（pool） NAT技术 病原体核酸检测技术(nucleic acid testing)是直接检测病原体核酸的一系列技术的总称 NAT敏感性高 检测核酸 大大缩短“窗口期” 可使输血传播疾病的危险性降低 NAT检测的技术方法 在PCR的基础上衍生 PCR技术 实时荧光定量PCR TMA(转录介导的扩增系统) 其他：NASBA, bDNA 大样本量血液筛查的扩增技术 PCR技术 TMA技术(转录介导的扩增系统(transc**tion mediated amplification) 不同的技术平台： PCR技术 PCR技术 衍生的技术 RT-PCR 巢式PCR 多重PCR PCR-SSP 不对称PCR 荧光定量PCR TaqMan探针法 TaqMan作用原理 转录介导的扩增方法 (TMA) 转录介导的扩增系统(transc**tion mediated amplification,TMA) 诺华诊断 鼠白血病病毒逆转录酶和T7 RNA多聚酶 在等温条件下来扩增RNA或DNA的反应系统 核酸序列依赖扩增系统(nucleic acidｓsequence based amplification,　NASBA) 荷兰产品 原理类似TMA 靶标扩增 NAT检测数据及其效果 NAT提高血液安全水平 国内数据 上海血液中心 美国Chiron Procleix HIV-1/HCV 8人份（36800） 24 人份混合（66739）； HCV NAT+: 0／103539 HIV NAT+: 0／103539 ELISA为进口试剂、国产 中国输血杂志，2003，16（3）：157-160

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