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细胞划痕实验

2012-08-29 13:46 阅读:2228 来源:爱爱医 责任编辑:潘乐乐
[导读] 材料: 6孔板 marker笔 直尺 20微升枪头(灭菌) 无血清培养基 PBS 准备: 所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内) 流程: 1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每

    材料:

    6孔板
    marker笔
    直尺
    20微升枪头(灭菌)
    无血清培养基
    PBS

    准备:

    所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)

    流程:

    1、先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀地划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
    2、在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
    3、第二天用枪头比着直尺,尽量垂直于背后的横线划痕,枪头要垂直,不要倾斜。
    4、用PBS洗细胞3次,去除划下的细胞,加入无血清培养基。
    5、放入37℃5%CO2培养箱培养。按0、6、12、24小时取样,拍照。


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