一、脂肪染色：

    （一）苏旦Ⅲ法

    试剂配制：
    苏旦Ⅲ0.1-0.2g，70%酒精100ml
    将苏旦Ⅲ置于70%酒精中，加热饱和，在未冷前过滤，静置一夜。

    染色步骤：
    1.细胞涂片。
    2.70%酒精固定1分钟。
    3.放入苏旦Ⅲ酒精溶液中20-30分钟。
    4.70%酒精洗去多余的染料。
    5.水洗。
    6.苏木素复染2-5分钟。
    7.1%盐酸酒精分化。
    8.水洗，蓝化，甘油封固。

    结果：脂肪桔黄或红色。一般用于确定胞浆内空泡究竟是糖原，水变性还是脂滴。

    （二）苏丹Ⅳ（猩红）（Sudan Ⅳ）染色法：

    试剂配制：
    苏丹Ⅳ1-2克加纯酒精70ml，10%氢氧化钠20ml，蒸馏水10ml，制成混合液，略加热，置37℃温箱中1小时，取出冷却后过滤，12小时后即可使用。此液5天内失效，建议配制70%酒精饱和液。

    染色步骤：
    1.细胞涂片。
    2.70%酒精固定1分钟。
    3.放入苏旦Ⅳ酒精溶液中20-30分钟。
    4.70%酒精洗去多余的染料。
    5.水洗。
    6.苏木素复染2-5分钟。
    7.1%盐酸酒精分化。
    8.水洗，蓝化，甘油封固。

    结果：脂肪呈猩红色。

    （三）油红染色法：

    试剂配制：
    油红O 0.5g，异丙醇100ml，配成饱和液，长期保存备用。
    油红稀释液的配制：取油红饱和液6毫升，加蒸馏水4毫升，静置5-10分钟后过滤后使用。

    染色步骤：
    1.细胞涂片。
    2.70%酒精固定1分钟。
    3.蒸馏水洗。
    4.油红稀释液染10-15分钟，避光、密封。
    5.60%乙醇镜下分化至间质清晰。
    6、水洗。
    7.Marry氏苏木素复染核。
    8.水洗。
    9.甘油或甘油明胶封片。

    结果：脂肪呈鲜红色，细胞核呈蓝色，间质无色。

    二、糖原染色

    过碘酸-Schiff（PAS）染色法

    试剂配制：
    碱性品红1g，活性炭2g，当量盐酸20ml，偏重亚硫酸钠1.5g

    Schiff试剂配制
    1.碱性品红1g，放入200毫升蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。
    2.冷却至50℃时过滤，滤液中加入当量盐酸20毫升。
    3.加偏重亚硫酸钠1.5g，置于暗处过夜。
    4.加活性2g，摇晃，过滤，以无色为最佳。棕色瓶，4℃冰箱保存。

    染色步骤
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2.1%过碘酸水溶液5-10分钟。
    3.蒸馏水洗多次。
    4.Schiff液10-15分钟。
    5.0.5%偏重亚硫酸钠（钾）水溶液洗2次（1-2分钟）
    6.流水冲洗10分钟。
    7.苏木素复染。（1-2分钟）
    8.酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。

    结果：糖原红色。

    注意：1.阴性对照片用淀粉酶消化处理。
              2.糖原容易水解，取材标本最好新鲜，不要经过水洗。
              3.固定液用中性福尔马林为佳。
              4.如Schiff液发红，再加入少量偏重亚硫酸钠，使液体颜色变清后又可使用

    三、粘液染色

    （一）阿尔辛蓝过碘酸雪夫（AB-PAS）染色法

    试剂配制：
    爱先蓝液：爱先蓝8GX1g，蒸馏水97ml，冰醋酸3ml
    核固红液：核固红0.1g，硫酸铝5g，蒸馏水97ml
    碱性品红1g，活性炭2g，当量盐酸20ml，偏重亚硫酸钠1.5g

    Schiff试剂配制
    1.碱性品红1g，放入200ml蒸馏水中，煮沸，搅拌，充分溶解。
    2.冷却至50℃时过滤，滤液中加入当量盐酸20ml。
    3.加偏重亚硫酸钠1.5g，置于暗处过夜。
    4.加活性2g，摇晃，过滤，以无色为最佳。棕色瓶，4℃冰箱保存。

    染色步骤
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2.蒸馏水洗
    3.3%冰醋酸浸5分钟
    4.爱先蓝液染10～20分钟
    5.蒸馏水洗
    6.1%过碘酸水溶液5-10分钟。
    7.蒸馏水洗多次。
    8.Schiff液10-15分钟。
    9.自来水中浸10分钟（经常换水）。
    10.酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固。

    结果：中性粘液呈红色，酸性粘液物质呈蓝色。中性与酸性粘液的混合物质呈紫红色。

    （二）Southgate胭脂红染色

    试剂配制：
    1.Southgate贮备液：胭脂红1g，无水酒精50ml，蒸馏水50ml升，氢氧化铝1g，无水氯化铝0.5g
    先将无水酒精和蒸馏水1：1混合，依次加入试剂，搅拌，水浴中煮沸3分钟，冷至室温过滤，并用50%酒精加至总量100ml，磨纱瓶冰箱保存。
    2.Southgate稀释液：用前取10ml贮存液加蒸馏水40ml。

    染色步骤
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2.苏木素染5～10分钟
    3.水洗，1%盐酸酒精分化
    4.水洗，蓝化
    5、蒸馏水洗
    6.Southgate稀释液染30分钟
    7.水洗
    8.95%酒精洗二次
    9.无水酒精脱水，透明，封固

    结果：酸性粘液呈红色。

    四、淀粉样蛋白

    （一）甲基紫法（Jurgens，1875）

    试剂配制：
    （1）1%甲基紫水溶液：甲基紫（methyl violet）1g，蒸馏水加至100ml
    （2）1%蜡酸水溶液：冰醋酸1ml，蒸馏水99ml

    操作方法：
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2、蒸馏水洗
    3、1%甲基紫水溶液染3-5分钟。
    4、水洗，在镜下观察。
    5、1%蜡酸水溶液分化，直至见淀粉样蛋白呈紫红色或红色，胞核呈蓝紫色。
    6、流水稍冲洗。

    用**树胶封片。或把涂片自然晾干后，用中性树胶封固。

    结果：淀粉样蛋白呈紫红色至红色。

   注意事项：
    1、如无甲基紫，也可用结晶紫代替，同样可获得异色反应。
    2、染好后的涂片不能用酒精脱水，因为此染料溶于酒精而立即脱色。
    3、染好后的涂片也不宜用甘油明胶封盖。

    （二）甲醇刚果红法（改良的Highman）

    （1）甲醇刚果红液：刚果红（congo red）0.5g，甲醇80ml，甘油20ml

    （2）碱性酒精分化液：氢氧化钾0.2g，80%酒精100ml

    操作方法：
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2、蒸馏水洗
    3.甲醇刚果红染液染10～20分钟
    4.用碱性乙醇分化液分化数秒
    5.水洗
    6.苏木素复染2分钟
    7.水洗数分钟
    8.脱水，透明，封固

    结果：淀粉样物呈桔红色。

    五、含铁血黄素

    普鲁士蓝反应：

    试剂配制：
    1.2%亚铁氢化钾水溶液：亚铁氢化钾2g，蒸馏水100ml
    2.2%盐酸水溶液：盐酸2ml，蒸馏水98ml
    3.0.1%沙红（safranine）溶液：沙红0.1g，蒸馏水100ml

    染色步骤
    1.细胞涂片，95%酒精固定60分钟以上。
    2、蒸馏水洗
    3.取2%亚铁氢化钾水溶液和2%盐酸水溶液等份混合，滴在涂片上，10～20分钟
    4.蒸馏水洗
    5.核复染
    6.水洗，脱水，透明，封固

    结果：含铁血黄素呈蓝色。